Opdateret d. 17. august Biosensor. Niveau 1. Øvelsesvejledning
|
|
- Freja Eskildsen
- 5 år siden
- Visninger:
Transkript
1 Opdateret d. 17. august 2017 Biosensor Niveau 1 Øvelsesvejledning
2
3 Vigtig information om brug af Biosensor-kittet for undervisere Før øvelsen startes er det vigtigt, at underviseren har læst følgende erklæring og lærervejledningen, som kan tilgås via: Dette kit, som indeholder BioBricks, kloningsenzymer og E. coli bakteriestamme, er godkendt til brug i undervisning i genteknologi i biologi, bioteknologi A, teknikfag og teknologi A på STX, HTX og HF. Aftalen med Arbejdsstyrelsen indebærer, at undervisningen skal varetages af en gymnasielærer, som har en biologisk uddannelsesbaggrund svarende til de af VTU udstukne faglige mindstekrav i biologi og som har gennemført et af Arbejdstilsynets godkendte kompetencegivende kurser i eksperimentel genteknologi af 2 dages varighed. Når eksperimenter, som er omfattet af aftalen, gennemføres i forbindelse med enkeltfaglig eller tværfaglig undervisning, har gymnasielæreren ansvar for, at forsøgene gennemføres efter de gældende retningslinjer. De gentologiske forsøg må kun udføres, dersom der senest 3 uger forud for arbejdet med forsøgene (herunder forarbejdet) er indsendt en indberetning til Undervisningsministeriets fagkonsulent i bioteknologi på det indberetningsskema, der indgår som en del af aftalen. Ved indberetning indsendes altid en udfyldt forside og mindst ét udfyldt bilag. Indberetningsskemaets forside skal underskrives af både den for forsøgenes udførelse ansvarlige lærer og skolens rektor/leder. Indberetningsskemaet kan findes på: Det er et krav, at du som lærer registrerer dig på: Under tilmeldingen skal der angives et kodeord. Kodeordet er blevet sendt til den registrerede kontaktperson på skolen. Findes skolen ikke på listen over tilmeldte skoler, kan skolen tilmeldes ved at skrive til: biosensor@bio.dtu.dk. Biosensor-kittet sendes til skolen én gang umiddelbart efter tilmeldingen. Kittet kan bruges i minimum 3 år, hvis det er opbevaret korrekt. Biotech Academy kan ikke stilles ansvarlig for holdbarheden af kittet. side 1 ud af 26
4 Biotech Academy forventer, at både underviseren og eleverne registrerer deres biosensorer via hjemmesiden. Biosensor-kittet kan udsendes omkostningsfrit til gymnasierne, fordi Biotech Academy har modtaget støtte fra private fonde og virksomheder. Biotech Academy s fremtidige mulighed for at udvikle spændende naturvidenskabeligt undervisningsmateriale afhænger af at kunne afrapportere til fonde og virksomheder. Derudover kan andre gymnasielever bruge resultaterne som inspiration til deres egne forsøg. side 2 ud af 26
5 Velkommen til Biotech Academy s Biosensor-øvelse Forestil dig, at du kunne designe en bakteriel biosensor, som kan hjælpe læger med at detektere kræft tidligere og derved redde liv, eller en bakterie, som kan finde plastik i havet og nedbryde det, eller måske noget helt tredje. I Biosensor-øvelsen skal du ikke blot forestille dig, hvordan du kan bruge bioteknologi til at løse problemstillinger. Du kan designe din egen biosensor og dernæst lave og teste den i laboratoriet. Du vil bruge de samme bioteknologiske metoder, som forskere og universitetsstuderende bruger. Det tager én dag at lave biosensoren. Når du har testet din biosensor, kan du dele den med andre elever og danske universitetsstuderende. Du kan også være heldig, at din biosensor bliver indsendt til igem - den største internationale konkurrence for syntetisk biologi. Vi håber, at øvelsen vil inspirere dig til at se, hvordan bioteknologi kan bruges til at løse nationale og globale udfordringer. Målet med Biosensor-kittet er, at du skal kunne lave mere end 500 forskellige biosensorer. Hvilken biosensor du laver er helt op til dig. Det er dog ikke muligt at detektere alt med Biosensor-kittet og vi arbejder stadig på at udsende alle de gener, som vi har i vores pipeline. Har du en god ide til en biosensor, kan du deltage i den årlige Biosensor-konkurrence med din ide. Hvis din idé er den bedste, laver vi biosensoren ved hjælp af DNA-syntese og udsender den til alle gymnasierne, som deltager i Biosensor-øvelsen. Hvis det alt sammen er lidt overvældende, så husk at du kan finde videoer som beskriver, hvad en biosensor er, og hvordan du designer den, på: Vi håber, at det bliver sjovt. God fornøjelse! Hilsen Pernille og Viktor fra Biotech Academy Projektet er sponsoreret af: Novo Nordisk Fonden, Novozymes A/S, Lundbeckfonden, New England Biolabs, BioNordika A/S, Otto Mønsted Fonden og SnapGene side 3 ud af 26
6 Indhold og opbevaring af Biosensor-kittet Biotech Academy udsender gratis Biosensor-kittet til danske gymnasier. Kittet indeholder kloningsenzymer, BioBricks (=biosensor-gener) og E. coli bakterier til en værdi over DKK. Da Biotech Academy er en non-profit organisation drevet af danske universitetsstuderende, er det kun muligt at sende ét Biosensor-kit ud per gymnasium. Kittet indeholder nok kloningsenzymer til at lave op til 200 biosensorer og kan holde i minimum 3 år. Vi håber derfor, at I vil passe godt på kittet, så andre elever på jeres gymnasium kan få glæde af det i flere år. Det er derfor vigtigt, at I opbevarer kittet korrekt. Kittet udsendes i to dele. Den første del udsendes af Biotech Academy i samarbejde med EduForce ved Danmarks Tekniske Universitet. Dette kit indeholder: E. coli bakteriestamme opbevares ved -20 eller -80 C Godkendt K12 stamme til brug i øvelsen. Cellerne er opløst i 15% glycerol. Det er bedst at opbevare dem ved -80 C, men de kan let holde sig i flere år ved -20 C. BioBricks (biosensor gener) opbevares ved -20 C Plasmid og genet findes alle i 1.5 ml tuber. Tuberne er markeret med et bogstav (A-H) efterfuldt af et tal (1-12). Kontrol-plasmider og biosensorer Kan bruges til at teste dine kompetente E. coli celler, eller hvis du ikke vil lave din egen biosensor. Kontrol-plasmiderne sendes sammen med biosensor-delene. 10 mg/ml chloramphenicol (1%) opløst i 96% ethanol opbevares ved -20 C Antibiotika til selektion af E. coli biosensor-transformanter. E. coli stammen, som er udsendt, er ikke resistent. Fryseboks DNA primere opbevares ved -20 C Disse kan bruges til at lave mere af en BioBrick, hvis man løber tør. Kloningsenzymerne er udsendt af New England Biolabs og deres danske samarbejdspartner BioNordika. Biotech Academy giver besked til BioNordika, når et Biosensor-kit skal udsendes. Kittet indeholder: side 4 ud af 26
7 Restriktionsenzymer opbevares ved -20 C EcoRI, XbaI, PstI og SpeI. Med kittet kommer en lille fryseboks. Opbevar altid enzymerne i boksen, når du tager dem ud af fryseren. Stil dem tilbage, så snart du er færdig med dem. T4 DNA-ligase opbevares ved -20 C Brug fryseboksen til at holde enzymet koldt, når du skal bruge det. Buffer til restriktionenzymer Buffer 2.1 opbevares ved -20 C Kan tøs op ved stuetemperatur. Buffer til T4 DNA-ligase opbevares ved -20 C Kan tøs op ved stuetemperatur. Denne buffer er ikke så stabil ved gentagne optøninger, så vi anbefaler, at man (første gang man bruger kittet), anvender et lille trick, som er beskrevet herunder. Flyder til vandbad Kittet skal opbevares ved -20 C. Når kloningsenzymerne tages ud af fryseren, skal de altid opbevares på is eller i den lille fryseboks, som følger med i kittet. Tag først kloningsenzymerne ud, lige før de skal tilsættes. Kloningsenzymerne skal altid tilsættes som det sidste. Når kloningsenzymerne er tilsat, bør de straks sættes tilbage i fryseren. Bufferne til kloningsenzymerne skal tø på is. Tag dem ud cirka 30 minutter, før du skal bruge dem. Bufferne til kloningsenzymerne er meget stabile bortset fra T4 DNA-ligase bufferen, da den indeholder ATP. Ved gentagen optøning og nedfrysning, mister T4 DNA-ligase bufferen sin aktivitet. Vi anbefaler derfor at pipettere T4-DNA ligase bufferen ud i mindre portioner (tuber eller PCR-rør). På denne måde optøs kun en lille del af bufferen hver gang. Det er ikke muligt at lave 200 af den samme (fx lilla) biosensor, da der i kittet kun er dele til at lave 20 af den samme biosensor. Løber I tør for en biosensor-del (BioBrick), er det muligt at lave mere af delen vha. PCR. Der skal som minimum være 0.5 L BioBrick tilbage, som skal bruges som template til PCR, så sørg altid for, at der er lidt tilbage i tuben, når I er færdige. Ønsker I at lave mere end 200 biosensorer, skal I bruge mere af T4 DNA-ligase. På projektets hjemmeside kan I finde guide til, hvordan dette kan bestilles. side 5 ud af 26
8 Biosensor-øvelsen I gennem hele øvelsen skal du bruge Biosensor-projektets online-portal: Du og din gruppe vil få jeres eget login til hjemmesiden tilsendt, når I er blevet oprettet af jeres underviser. Øvelsen består af fire dele og kan med fordel udføres i grupper på 3-4 elever, som er interesseret i de samme bioteknologiske problemstillinger Design Lav biosensor i laboratoriet Test biosensor i laboratoriet Dokumentér Hvad er en biosensor? En biosensor er en bakterie, som kan detektere et input og give et respons. Vi har lavet en video, som forklarer, hvad en biosensor er. Se den på: I biosensor niveau 1 øvelsen skal du lave en biosensor, som altid er tændt. Det betyder, at dine E. coli bakterier altid udtrykker det gen, som du sætter ind i dem. Hvis du sætter et gen ind, som producerer et blåt farvestof, så bliver dine celler blå. Hvis du sætter et laktosenedbrydende enzym ind, så kan dine bakterier gro på laktose (mælkesukker). Du vælger selv blandt de 25 gener, hvilket gen, du har lyst til at arbejde med. side 6 ud af 26
9 1. Design biosensor Step 1 - Opret dig på biosensor.dk For at kunne oprette en biosensor skal du/i være registreret på biosensor.dk. Du kan registrere dig under Elev > Tilmeld dig med elevkode. Du skal bruge en elevkode, som din lærer giver dig. Når du er tilmeldt får du tilsendt en med et link. Klik på linket for at aktivere din bruger. Du kan nu logge ind. Hvis du har brug for at ændre dit password kan du klikke på dit navn i øverste højre hjørne og vælge Min profil. Når I alle er oprettet kan din lærer tilføje dig/jer til en gruppe. Du får automatisk besked på , når du bliver tilføjet til en gruppe. Først når din/jeres gruppe er oprettet kan I registrere din/jeres biosensor. Step 2 Design biosensor Til biosensor niveau 1 skal du/i vælge det responsgen fra BioBrick Exploren, som du/i ønsker at arbejde med. Biobrick Exploren findes på forsiden af hjemmesiden (klik evt. på Biosensor logoet i øverste venstre hjørne). Hvert gen kommer i en tube, som er markeret med et bogstav (A-H) efterfulgt af et tal (1-12). Det kan være en god idé at se, om der allerede er nogle andre, som har lavet en biosensor, som har det samme gen, som du har valgt. Du kan nemlig bruge andre elevers rapporter som inspiration til, hvordan du kan teste din biosensor. Du må selvfølgelig gerne lave en bio- side 7 ud af 26
10 sensor, som allerede er lavet før. Du kan se alle biosensorer, som er færdige i BioBrick Exploren på forsiden. Step 3 Opret biosensor Når du/i har besluttet jer for, hvilken biosensor I gerne vil lave, skal én af jer oprette biosensoren. Det kan du via dit Dashboard, som du finder i øverste højre hjørne. Klik herefter på Opret biosensor. Du/I skal vælge Plasmid Niveau 1 under Detektor-gen. Vælg desuden responsgenet og giv din/jeres biosensor et navn. Desuden er der noget information, som I skal læse og klikke, at I er indforstået med. Det er for, at Biotech Academy er sikre på, at jeres lærer har givet jer den nødvendige information om håndtering af GMO i laboratoriet. side 8 ud af 26
11 Hvis I er interesseret i at læse mere om GMO, så findes der en god artikel om GMO og antibiotika resistens på Biotech Academy s hjemmeside: er-vira-og-antibiotikaresistens/teori/antibiotika-og-resistens side 9 ud af 26
12 2. Lav biosensor i laboratoriet Den eksperimentelle del af øvelsen er delt op i tre dele. På biosensor-projektets hjemmeside kan du finde videoer, som viser, hvordan øvelsen foregår. Del Eksperiment Tid 2.a Klipning af gen med restriktionsenzymer 2 timer 2.b Ligering af plasmider 1.5 time 2.c Transformation af E. coli (GMO protokol) 3 timer Du kan vælge at udføre hele øvelsen på én dag eller over flere dage. Efter hver deløvelse er det muligt at stoppe øvelsen. Det eneste du skal gøre er at sætte reaktionen (PCR rør eller tube) i fryseren. Øvelse 2.c er GMO-øvelse og der skal derfor anvendes dækpapir på arbejdspladsen. Al affald skal smides i en autoklaveringspose til GMO-affald, og lokalet skal mærkes, inden øvelsen må påbegyndes. Til øvelsesdelen 2.c skal der forberedes kompetente E. coli celler. Underviseren bør gøre dette før øvelsen (skal startes senest dagen før øvelse 2.c udføres). Kompetente celler er celler, som kan optage DNA. E. coli bakteriecellerne gøres kompetente ved at behandle dem med en saltopløsning. Baggrund På kan du finde videoer som beskriver, hvad der sker i øvelsen. Du kan også finde videoer, hvor du kan se, hvordan man udfører øvelserne i laboratoriet. Figuren på næste side viser, hvad der sker i øvelsen. I øvelse 2.a klipper du dit gen med to forskellige restriktionsenzymer. Et restriktionsenzym er et enzym, som kan genkende et bestemt stykke DNA. Forskellige restriktionsenzymer genkender forskellige DNA-sekvenser og klipper forskelligt i DNA et. Når de klippes, produceres sticky ends, som gør, at den ene af de to DNA strenge er lidt længere end den anden. De to forskellige sticky ends passer ind i side 10 ud af 26
13 plasmidet, som tilsættes i øvelse 2.b. Når man i øvelse 2.b tilsætter et enzym, som hedder DNA ligase, så limes genet ind i plasmidet. Plasmidet indeholder de nødvendige genetiske dele, som gør at plasmidet kan dele sig inde i E. coli bakterien. Disse dele er: et replication origin, som er nødvendigt for at plasmidet kan blive i cellen, og et resistensgen, som gør E. coli bakterier, der indeholder resistensgenet, modstandsdygtige overfor antibiotikummet chloramphenicol. side 11 ud af 26
14 2.a Klipning af plasmid og gen med restriktionsenzymer = 2 timer Til hver biosensor skal du have en tube, hvor du har klippet dit valgte gen med to restriktionsenzymer: Gen: XbaI + PstI Hvad er et mastermix? Et mastermix er ligesom en portion pandekagedej. Det er besværligt at lave dej til én pandekage, da det ikke er nemt at tilsætte 1/10 æg. Det samme gælder for genteknologi. Hver reaktion indeholder 0.2 L restriktionsenzym. Det er næsten umuligt at pipettere, medmindre man har en meget sensitiv pipette. Skal man lave 5 forskellige biosensorer eller er man 5 forskellige grupper, kan man derfor lave et mastermix til 5 reaktioner. Så skal man pipettere 1.0 L enzym i stedet for 0.2 L. Ulempen er, at der normalt aldrig er nok til 5 reaktioner. Ligesom pandekagedej, så sidder en del af dejen på skeen (her pipettespidsen) og går derfor tabt. Man skal derfor lave mastermix til n+1 reaktioner, hvor n er antallet af reaktioner. Når man laver et mastermix, skal man tilsætte alt undtagen DNA (husk at tilsætte enzymet til sidst) og pipettere 4 L ud i en tube til hver gruppe. Hvorfor skal restriktionsenzymerne inaktiveres? I øvelse 2.b skal dit gen blandes sammen med et plasmid. Hvis man ikke har inaktiveret restriktionsenzymerne inden, så klipper XbaI i plasmidet. Det betyder, at man ikke kan samle biosensoren. side 12 ud af 26
15 Protokol: Du skal bruge følgende dele fra Biosensor-kittet: Gen (find koordinat på NEB Buffer 2.1 Fryseboks Husk at restriktionsenzymerne først skal tages ud lige inden de skal tilsættes. Opbevar dem på is eller i fryseboksen: Restriktionsenzym XbaI Restriktionsenzym PstI Du skal desuden bruge: Autoklaveret demineraliseret vand PCR tube eller 1.5 ml Eppendorf tube En varmeblok eller varmeskab indstillet til 37C. (Hvis laboratoriet har en PCR-maskine, kan den med fordel bruges.) Pipetter og pipettespidser Is En centrifuge til at spinne væksen i din tube ned i bunden, så alle reagenserne bliver ordentligt blandet. side 13 ud af 26
16 Fremgangsmåde: 1. Angiv hvilke koordinat du skal bruge: Gen: 2. Fyld en bøtte med is. Optø NEB Buffer 2.1 og tuben med dit valgte gen på is. Det tager cirka 30 minutter. 3. Imens du venter, udregn hvor meget der skal tilsættes af hvert reagens til mastermixet. Husk at lave til én ekstra. Vælg en gruppe, som laver mastermixet. 4. Gruppen, som laver mastermix: Tilsæt først vand og buffer. Sæt låg på tuben og slå let på den for at blande. Man kan også blande ved at pipettere op og ned, men så risikerer man at danne en masse luftbobler. Stil restriktionsenzymerne i den lille fryseboks, som medfølger (eller på is). Pipettér enzymet. Enzymet er opløst i glycerol, så der sidder ofte også enzym på siden af pipettespidsen. (Husk at skifte pipettespids før du pipetterer det næste enzym!) Bland forsigtigt mastermixet ved at slå på tuben. Reagens Volumen Master-mix ddh 2O 10x Buffer 2.1 Gen PstI XbaI Total volumen 2.8 L 0.8 L 4.0 L 0.2 L 0.2 L 8.0 L 5. Hver gruppe pipetterer 4 L master-mix ud i hver sin tube. Markér tuben med G/gen samt gruppenummer, så du kan genkende din tube fra de andre gruppers. 6. Tilsæt 4 L af dit gen til tuben markeret med G/gen 7. Klip genet ved at inkubere tuben ved 37C i en time. side 14 ud af 26
17 8. Inaktivér restriktionsenzymerne ved 80C i 20 minutter. Hvis I bruger en PCR-maskine, kan I derfor indstille et program. Hvis I ikke bruger en PCR-maskine kan I i stedet bruge et varmeskab eller en varmeblok. Sørg for at låget på tuben er ordentligt lukket. 9. Spin indholdet i tuben ned, så al væsken er i bunden. Gå direkte til øvelse 2.b eller opbevar din tube med gen på is eller i fryseren, indtil du starter øvelse 2.b. Mastermixen kan smides ud. Spørgsmål til øvelsen (valgfrit): 1. Tegn genkendelsessekvensen for restriktionsenzym PstI, XbaI og SpeI Du finder den på: Indtast navnet på restriktionsenzymet i søgefeltet i øverste højre hjørne. Fx er genkendelsessekvensen for EcoRI: Hjælp: For nogle enzymer findes der to versione,r fx EcoRI og EcoRI-HF. Nogle gange kommer restriktionsenzymer til at klippe forkert. HF står for High-Fidelity og betyder, at nogle forskere har modificeret enzymerne, så de ikke laver ligeså mange fejl. Genkendelsessekvensen er stadig den samme. 2. Hvilke to restriktionsenzymer (PstI, XbaI, SpeI) producerer sticky ends, som kan limes sammen? (Husk at A altid parrer med T, og C altid parrer med G). side 15 ud af 26
18 3. Hvad betyder de her logoer? Du kan finde logoet inde på et af restriktionsenzymerne. Prøv at klikke på det. 4. En ven har givet dig noget restriktionsenzym, men din ven kan ikke huske, om det er PstI eller PstI-HF. Hvilken buffer vil du vælge til din klipning? Hjælp: Restriktionsenzymer er kun aktive, hvis de er i en bestemt buffer. NEB har 5 forskellige buffere: Buffer 1.1, 2.1, 3.1, 4.1 og CutSmart bufferen, som de fleste restriktionsenzymer er aktive i. Du kan se aktivteten af dit restriktionsenzym ved at søge på restriktionsenzymet. Cirka halvvejs nede på siden står aktiviteten angivet. side 16 ud af 26
19 2.b Ligering af plasmid T4 DNA-ligase er et enzym, som limer DNA-stykker sammen. Enzymet kræver ATP, som er tilsat til bufferen. Protokol Du skal bruge følgende dele fra Biosensor-kittet: T4 DNA-ligase buffer T4 DNA-ligase (Skal først tages ud af fryseren lige før den skal bruges) Du skal desuden bruge: Dit gen fra øvelse 2a Plasmid (BioBrick A1) Autoklaveret demineraliseret vand PCR tube eller 1.5 ml Eppendorf tube Pipetter og pipettespidser Is side 17 ud af 25
20 Fremgangsmåde: 1. Fyld en bøtte med is og tø T4 DNA-ligase bufferen og plasmidet A1 på is. Det tager cirka 30 minutter. Der er kun én tube af hver, så alle grupper skal deles om tuben. Når I giver tuben til en ny gruppe, så skal gruppen medbringe deres isboks, så tuben er på is hele tiden. 2. Bland følgende reagenser sammen i den rækkefølge, som de er angivet; i skemaet under. Tag T4 DNA-ligasen ud af fryseren lige før du skal bruge den. Transportér den i den lille fryseboks eller på is og stil den tilbage, så snart du er færdig med den. Reagens ddh 2O T4 DNA-ligase buffer Plasmid A1 Klippet gen T4 DNA-ligase Total volumen Reaktion 5.5 L 2.0 L 4.0 L 8.0 L 0.5 L 20.0 L 3. Lim genet ind i plasmidet ved at lade reaktionen stå ved stuetemperatur på bordet i 30 minutter. Enzymet er aktivt ved stuetemperatur, men den optimale aktivitet er ved 16C. Reaktionen kan evt. sættes i en PCR-maskine. 4. Fortsæt derefter direkte til transformationen (del 1.d) eller opbevar legeringen i fryseren ved -20C indtil næste øvelsesdag. side 18 ud af 26
21 2.c Transformation GMO-øvelse: I denne del af øvelsen arbejdes der med GMO. Arbejdspladsen skal derfor dækkes med papir, alt affald skal i en autoklaveringspose til GMO-affald, og øvelseslokalet skal mærkes. Obs! Denne del af øvelsen kræver, at de kompetente E. coli bakterieceller er klar. Dette tager 2 dage. Den øvelsesansvarlige bør stå for eksperimentet. Protokollen findes i lærervejledningen. Cellerne kan forberedes lang tid inden (flere måneder) og opbevares ved -80C. Der skal desuden forberedes sterile LB agarplader med chloramphenicol og sterilt SOC medie til forsøget (se lærervejledningen). Efter at plasmidet er ligeret sammen, er det nu klart til at blive transformeret ind i E. coli bakterieceller. Plasmidet kommer ind i cellerne vha. et kort heat shock ved 42C. I langt de fleste tilfælde kommer plasmidet dog ikke ind i cellerne derfor er der millioner af celler i hver tube. For at være sikker på, at det kun er de celler, som har fået plasmidet ind, som kan gro, anvender man selektion. Plasmidet psb1c3 indeholder et gen, som gør cellerne resistente over for antibiotikummet chloramphenicol. Transformationen plades derfor på agarplader med chloramphenicol. Hver gruppe skal lave to transformationer: biosensoren samt en positiv kontrol. Den positive kontrol er et plasmid med et rødt farvegen. Hvis der er gået noget galt i øvelse 2.a eller 2.b, vil man stadig få kolonier for den positive kontrol. Hvis man får hvide kolonier på den positive kontrol, så ved man er noget er gået galt. Den positive kontrol fungerer derfor også som en negativ kontrol. Man kan derfor spare på de kompetente celler, da de tager lang tid at lave. Hvis man har ekstra celler eller ønsker det, er det selvfølgeligt muligt også at lave en negativ kontrol. Det er altid en god praksis. Transformationen er den samme for den negative kontrol, dog skippes trin 6 i forsøgsprotokollen. Biosensor: Din legering fra øvelse 2.b Positiv kontrol: Positiv kontrol (plasmid) H12 side 19 ud af 26
22 Protokol Du skal bruge følgende dele fra Biosensor-kittet: Den positive kontrol er i brønd H12 (nederste højre hjørne) Flyder til tuber Du skal desuden bruge: 2 tuber med kompetente E. coli celler (se lærervejledning) Din biosensor (øvelse 2.b) 2 LB agarplader med 10 g/ml chloramphenicol Sterilt SOC medie (se lærervejledning) Pipetter og pipettespidser Is Vandbad eller varmeblok indstillet til 42C Drigalskyspatel Bunsenbrænder side 20 ud af 26
23 Fremgangsmåde: Dag 1: 1. Klargør din arbejdsplads. Læg papir på arbejdspladsen og opstil en autoklaveringspose til GMO-affald. Lokalet skal være mærket. 2. Det er meget vigtigt, at de kompetente celler altid er på is indtil trin Hver gruppe skal bruge 2 tuber med kompetente celler (50 L i hver). Hvis cellerne er forberedt inden, tag cellerne ud af fryseren og stil dem direkte på is. 4. Optø cellerne langsomt på is (tager cirka 5 minutter) 5. Marker tuberne med Biosensor og positiv kontrol. Husk også gruppenummer. 6. Tilsæt 5 L af den legerede biosensor (fra øvelse 2.c) til tuben markeret med Biosensor. 7. Tilsæt også 1.0 L af det positive kontrol-plasmid til tuben positiv kontrol. 8. Mix forsigtigt DNA og celler ved at rulle tuben rundt i luften. Undgå at holde på bunden af tuben, hvor cellerne er. Så varmer du dem op. Stil straks cellerne tilbage på is. 9. Lad cellerne stå på is i 30 minutter. I mens du venter så fortsæt til step Varm varmeblokken eller vandbad op til 42C. 11. Når de 30 minutter er gået, flyt alle tuberne til vandbadet/varmeblokken i nøjagtig 30 sekunder. 12. Tag straks rørene op af varmeblokken og placér dem på is i 5 minutter. 13. Pipettér 950 L sterilt SOC medie ud i hver tube. 14. Inkubér transformationen ved 37C i 2-3 timer for at give E. coli cellerne tid til at udtrykke antibiotika-resistensgenet. Cellerne bør inkuberes i 2 timer, hvis de inkuberes under ryst. Ellers bør de inkubere i 3 timer for at sikre sig, at cellerne er begyndt at udtrykke resistens-genet. 15. Tænd bunsenbrænderen. I de næste steps arbejd tæt på bunsenbrænderen, så udpladningen af celler foregår sterilt. 16. Ryst forsigtigt tuben, så cellerne og SOC-mediet er blandet. Pipettér 200 L af cellerne) ud på en agarplade med 10 µg/ml chlorampenicol. Husk at navngive pladerne (bunden af pladerne), så du kan kende forskel. 17. Dyp spatelen i ethanol og hold den ind under bunsenbrænderen. Tag den ud, så den kan køle af. Tryk den forsigtigt ned på agarpladen et sted, hvor der ikke er celler, så du er sik- side 21 ud af 26
24 ker på, at den er kold. Hvis den stadig er meget varm, vil alle cellerne dø. Brug så spatelen til at plade cellerne ud over hele pladen. Du kan holde låget til petriskålen tæt over pladen, så du mindsker risikoen for kontaminering. 18. Lad pladerne tørre tæt på bunsenbrænderen med låget halvt af. 19. Når pladerne er tørre vend dem rundt, så bunden er opad og put dem i en pose. Inkubér plasticposen ved 37C til næste dag eller alternativt ved stuetemperatur på labbænken i 3 dage. Dag 2: 1. Kig på dine plader. Tæl antallet af kolonier på hver af de tre plader og indfør numrene i skemaet under. Den positive kontrol er rød, da den indeholder et farvegen. Du skal tælle, hvor mange røde og hvor mange hvide kolonier, der er på den positive kontrol. Er dit valgte gen ikke et farvestof, skal du dyrke kulturen for at udtrykke og teste dit enzym. Du kan læse mere om det længere nede. Biosensor Positiv kontrol Antal kolonier 2. Opbevar pladerne med kolonier i en tillukket pose i køleskabet. Husk at agaren skal vende opad. Det forhindrer at pladerne udtørrer. Når du er færdig med forsøget alle agarpladerne og posen smides ud i GMO affald. Hvis du har valgt en lugt (banan eller lime), så er du nødt til at opvokse dine kolonier i en kultur. Det gør du ved at tilsætte lidt af en koloni til en LB kultur 3-10 ml og inkubér den til næste morgen. Husk at kulturen er GMO, så du skal arbejde sterilt og autoklavere kulturen bagefter. Du kan finde vejledninger til dyrkning af bakteriekultur på biosensor-hjemmesiden Spørgsmål til øvelsen 1. Hvordan ser kolonierne ud for din biosensor? (Er de farvede? Hvorfor er de farvede?) side 22 ud af 26
25 2. Hvorfor tilsætter man antibiotika til agarpladerne? (Hvordan tror du, at pladerne ville se ud, hvis der ikke var antibiotika på?) 3. Hvis der er både er røde og hvidgullige kolonier på den positive plade, hvad betyder det så? (Man bør altid lave en positiv/negativ kontrol, så man ved om ens eksperiment virker) side 23 ud af 26
26 3. Test af biosensor GMO-øvelse: I denne del af øvelsen arbejdes der med GMO. Arbejdspladsen skal derfor dækkes med papir, alt affald skal i en autoklaveringspose til GMO-affald, og øvelseslokalet skal mærkes. Du kan allerede næste dag se, om din biosensor virker. Biosensoren virker, hvis dine kolonier er farvede. De forskellige farvegener er ikke altid lige hurtige til at udvikle farven. Du kan læse om dit farvegen på biosensor hjemmesiden. Du kan også læse andre gruppers rapporter og se, hvornår de så farven. Nogle farvegener skal aktiveres af UV-lys. UV-lys kan være skadeligt, derfor skal du have beskyttelsesudstyr på efter samme forholdsregler, som når man tager billeder af DNA/agarosegeler. Enzymerne i kittet er tagget med et grønt farvegen. Det betyder, at du også næste dag kan se, om din biosensor har virket, men da du har valgt et enzym kan du bagefter teste enzymet. Du kan læse mere under hvert enzym på biosensor-hjemmesiden. Obs! Denne del af forsøget er valgfrit. Det er ikke nødvendigt at teste din biosensor, men denne del af projektet giver dig også mulighed for at være kreativ. Har du en god idé til, hvordan man let kan måle? Protokol til vækstforsøg og måling af absorbans måling og/eller enzymaktivitet Du skal bruge følgende fra kittet: Antibiotikummet chloramphenicol (1% i ethanol) Derudover skal du bruge: Plastik falcon tube eller glastube til dyrkning af E. coli celler LB medium Sterile podenåle eller autoklaverede tændstikker Pipetter og pipettespidser side 24 ud af 26
27 Protokol til vækstforsøg 1. Klargør din arbejdsplads. Læg papir på arbejdspladsen og opstil en autoklaveringspose til GMO-affald. Lokalet skal været mærkes. Tænd bunsenbrænderen. 2. Tilsæt LB medium og chloramphenicol til væksttuben. 5 ml kultur er nok til enzym-assay, men hvis du også skal måle absorbans, er det bedre at have rigeligt med celler. Opvoks derfor en kultur på 10 ml. Du skal tilsætte chloramphenicol til en koncentration på 10 µg/ml. Det svarer til 10 µl 1% chloramphenicol i 10 ml. 3. Udtag med en steril tandstik eller podenål en koloni og tilsæt den til vækstmediet. Luk tuben. 4. Kun til måling af absorbans: Tag 1 ml kultur ud til måling af absorbans. Mål med det samme. Dette er nulprøven ved 0 timer. Husk at bruge 1 ml LB medium til at nulstille spektrofotometeret med. 5. Inkubér tuben ved 37 C under rystning/omrøring. 6. Tag prøver hver time. Husk, at når absorbansen er over 1.2, skal du fortynde kulturen for at få en nøjagtig måling. Du kan måle, hvor hurtigt bakterierne vokser ved at måle absorbansen ved 600 nm. 7. Efter endt forsøg skal alle prøver hældes i en glasflaske til GMO-affald. Flasken skal autoklaveres. side 25 ud af 26
28 4. Dokumentér Når du er færdig med eksperimentet skal du lægge et billede op af din biosensor (eller et billede fra dit forsøg) samt et kort resumé. Du kan desuden vælge at lægge en rapport eller forsøgsprotokol, som du afleverer til din lærer, op. Dette er dog helt valgfrit. Hvis du vælger at gøre det, har du mulighed for at deltage i biosensor-konkurrencen (du vælger selv om du vil deltage) samt om andre elever må læse din rapport. Husk at fjerne cpr-nummer eller anden information fra din rapport. Spørg din/jeres lærer, så I er sikre. Selvom dette er den sidste del af øvelsen og det kan være nemt at springe den over, så er denne del faktisk den vigtigste. Andre elever, lærere og gymnasier kan nemlig bruge dine resultater og gode idéer til deres egne projekter. På denne måde håber Biotech Academy, at landets gymnasier kan dele deres opfindelser, opdagelser og interessante projekter. Er du i tvivl om, hvad du skal skrive, kan du finde inspiration i allerede uploadede rapporter på Du kan finde svarerne til spørgsmålene fra øvelsen på: Til sidst håber vi, at du selvfølgelig vil uploade billeder af din biosensor på andre sociale medier og at du gerne vil være med til at udbrede øvelsen. Du kan bruge tag #biosensor og #biotechacademy. side 26 ud af 26
Biosensor Niveau 1 Øvelsesvejledning
Opdateret august 2018 Biosensor Niveau 1 Øvelsesvejledning Vigtig information om brug af Biosensor-kittet for undervisere Før øvelsen startes er det vigtigt, at underviseren har læst følgende erklæring
Læs mereBiosensor. by Biotech Academy. Øvelsesvejledning
Biosensor by Biotech Academy Øvelsesvejledning Vigtig information om brug af biosensor kittet for undervisere Før øvelsen startes, er det vigtigt at underviseren har læst følgende erklæring og lærervejledningen,
Læs mereDette er en kladde til et genoptryk af Eksperimentel Genteknologi fra 1991. Ideer, rettelser og forslag modtages gerne. Kh Claudia.
Transformation af E.coli K 12 Version 3. marts 2009 (C) Claudia Girnth-Diamba og Bjørn Fahnøe Dette er en kladde til et genoptryk af Eksperimentel Genteknologi fra 1991. Ideer, rettelser og forslag modtages
Læs mereRegnskovens hemmeligheder
Center for Undervisningsmidler, afdeling København Regnskovens hemmeligheder Øvelsesvejledning Formål Et gen for et kræfthelbredende protein er blevet fundet i nogle mystiske blade i regnskoven. Forskere
Læs mereElevvejledning pglo transformation
Introduktion til transformation Elevvejledning pglo transformation I denne øvelse skal du lære fremgangsmåden ved genetisk transformation. Husk på, at et gen er et stykke DNA, der indeholder informationer
Læs mereGreen Fluorescent Protein (GFP) Oprensning af GFP
1 Green Fluorescent Protein (GFP) Oprensning af GFP Katalognummer 166-0005EDU www.biorad.com Oversat og bearbejdet af Birgit Sandermann Justesen, Nærum Gymnasium Revideret februar 2010. Kontakt: Birgitjustesen@gmail.com
Læs mereMælkesyrebakterier og holdbarhed
Mælkesyrebakterier og holdbarhed Formål Formålet med denne øvelse er at undersøge mælkesyrebakteriers og probiotikas evne til at øge holdbarheden af kød ved at: 1. Undersøge forskellen på bakterieantal
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Side 1 af 8 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA sekvens,
Læs mereMælkesyrebakterier og holdbarhed
Mælkesyrebakterier og holdbarhed Navn: Forsøgsvejledning Mælkesyrebakterier og holdbarhed Formål med forsøget Formålet med denne øvelse er at undersøge mælkesyrebakteriers og probiotikas evne til at øge
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Forsøgsvejledning Navn: Side 1 af 7 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Side 1 af 8 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA-sekvens,
Læs mereTest dit eget DNA med PCR
Test dit eget DNA med PCR Navn: Forsøgsvejledning Side 1 af 8 Formål med forsøget Formålet med dette forsøg er at undersøge jeres arvemateriale (DNA) for et transposon kaldet Alu. Et transposon er en DNA-sekvens,
Læs mereProteinelektroforese af GFP Suppleringskit til pglo
Proteinelektroforese af GFP Suppleringskit til pglo Katalognummer nr. 166 0013EDU www.bio rad.com Oversat og bearbejdet af Birgit Sandermann Justesen, Nærum Gymnasium, Nærum Hovedgade 30, 2850 Nærum Birgitjustesen@gmail.com
Læs mereKonkurrence mellem to bakteriearter
1 Biologi-forsøg: Populationsbiologi/evolution Konkurrence mellem to bakteriearter Forsøget undersøger, hvordan en ydre miljøfaktor (temperatur) påvirker konkurrencen mellem to forskellige arter. I dette
Læs mereDNA origami øvelse DNA origami øvelse
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereDNA origami øvelse 2013. DNA origami øvelse
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereFORSØG ØL verdens første svar på anvendt
FORSØG ØL verdens første svar på anvendt bioteknologi Biotech Academy BioCentrum-DTU Søltofts Plads DTU - Bygning 221 2800 Kgs. Lyngby www.biotechacademy.dk bioteket@biocentrum.dtu.dk INDHOLDSFORTEGNELSE
Læs mereMasseeksperiment Jagten på de gode bakterier Protokol: Trin for trin-guide til selve eksperimentet
Masseeksperiment 2018 Jagten på de gode bakterier Protokol: Trin for trin-guide til selve eksperimentet Protokol Trin for trin guide til selve eksperimentet Masseeksperimentet kan gennemføres i uge 38,
Læs mereUndersøgelse af forskellige probiotiske stammer
Undersøgelse af forskellige probiotiske stammer Formål Formålet med denne øvelse er: 1. At undersøge om varer med probiotika indeholder et tilstrækkeligt antal probiotiske bakterier, dvs. om antallet svarer
Læs mereRegnskovens hemmelighed
1 Regnskovens hemmelighed Katalognummer 1660006-EDU www.bio-rad.com Oversat og bearbejdet af Birgit Sandermann Justesen, Nærum Gymnasium Revideret februar 2010. Kontakt: Birgitjustesen@gmail.com Brugen
Læs mereGAPDH PCR modul Manual
GAPDH PCR modul Manual Katalog nr. 166-5010EDU explorer.bio-rad.com Kopiering kun tilladt til undervisningsbrug Bemærk: Kittet indeholder temperaturfølsomme dele. Åbn derfor straks kassen og læg de pågældende
Læs mereFORSØG ØL verdens første svar på anvendt
FORSØG ØL verdens første svar på anvendt bioteknologi Biotech Academy BioCentrum-DTU Søltofts Plads DTU - Bygning 221 2800 Kgs. Lyngby www.biotechacademy.dk bioteket@biocentrum.dtu.dk INDHOLDSFORTEGNELSE
Læs merepglo-transformationskit
1 Katalog nummer 166-0003-EDU www.bio-rad.com pglo-transformationskit arac ori pglo bla GFP Oversat og bearbejdet af Birgit Sandermann Justesen og Lars Moeslund, 2007 Revideret november 2009. Kontakt:
Læs merepglo-transformationskit
Katalog nummer 166-0003-EDU pglo-transformationskit arac ori pglo bla GFP Oversat og bearbejdet af Birgit Sandermann Justesen og Lars Moeslund, 2004 Brugen af dette kit til undervisningsbrug skal varetages
Læs mereLigerings- og transformationsmodul inklusiv plasmidoprensning og restriktionsanalyse
Biotechnology Explorer Ligerings- og transformationsmodul inklusiv plasmidoprensning og restriktionsanalyse Katalog nr. 166-5015EDU explorer.bio-rad.com Kopiering kun tilladt til undervisningsbrug Bemærk:
Læs mereDNA origami øvelse. Introduktion. DNA origami øvelse 3 timer 2018
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereFind enzymer til miljøvenligt vaskepulver
Find enzymer til miljøvenligt vaskepulver Enzymer, der er aktive under kolde forhold, har adskillige bioteknologiske anvendelsesmuligheder. Nye smarte og bæredygtige produkter kan nemlig blive udviklet
Læs mereBiotechnology Explorer
Biotechnology Explorer Green Fluorescent Protein (GFP) Oprensnignskit Katalognummer 166-0005-EDU www.bio-rad.com For teknisk service bedes du ringe til dit lokale Bio-Rad kontor Office or in the U.S. Call
Læs mereBiotechnology Explorer
Biotechnology Explorer Genes in a Bottle Kit DNA Extraction Module Lav et halssmykke med dit eget DNA Katalognr.: 166-2000EDU Dertil kan man købe ekstradele, hvis der skal laves halskæder til eleverne.
Læs mereForsøgsprotokol til larveforsøg: Tilsætning af 3 dage gamle larver til gødning inficeret med patogene bakterier
Forsøgsprotokol til larveforsøg: Tilsætning af 3 dage gamle larver til gødning inficeret med patogene bakterier Formål: at undersøge udviklingen i mængden af tilsatte patogene bakterier til hønsegødning.
Læs mereAnalyse af proteiner Øvelsesvejledning
Center for Undervisningsmidler, afdeling København Analyse af proteiner Øvelsesvejledning Formål At separere og analysere proteiner i almindelige fødevarer ved brug af gelelektroforese. Teori Alle dele
Læs mereEn forsker har lavet et cdna insert vha PCR og har anvendt det følgende primer sæt, som producerer hele den åbne læseramme af cdna et:
F2011-Opgave 1. En forsker har lavet et cdna insert vha PCR og har anvendt det følgende primer sæt, som producerer hele den åbne læseramme af cdna et: Forward primer: 5 CC ATG GGT ATG AAG CTT TGC AGC CTT
Læs mereBestemmelse af celletal
Bioteknologi 2, Tema 3 Forsøg 4 Bestemmelse af celletal Mange klassiske mikrobiologiske metoder har til formål at undersøge hvor mange mikroorganismer man har i sin prøve. Det undersøger man gennem forskellige
Læs mereBiotechnology Explorer. Regnskovens hemmelighed
Biotechnology Explorer Regnskovens hemmelighed Katalognummer 166-0006-EDU explorer.bio-rad.com For teknisk service bedes du ringe til dit lokale Bio-Rad kontor Office or in the U.S. Call 1-800-4BIORAD
Læs mereBiotechnology Explorer
Biotechnology Explorer pglo Transformationskit Katalognummer 166-0003-EDU explorer.bio-rad.com Dette kit skal opbevares ved stuetemperatur Kopiering af enhver del af dette dokument er kun tilladt til undervisningsbrug
Læs mereKapitel 1 Genteknologi (1/6)
Kapitel 1 Genteknologi (1/6) Transformation FOTO: SØREN LUNDBERG FORMÅL At isolere plasmider fra plasmidbærende bakterier og overføre dem til andre bakterier. TEORI Transformation er den teknik, hvor generne
Læs mereBiosensor Niveau 1. Teori
Biosensor Niveau 1 Teori Inden du starter... For at kunne forstå teorien som ligger til grund for en biosensor er det vigtigt at du har styr på nogle generelle mikro/molekyler biologiske principper, begreber
Læs mereLaboratorieprotokol for manuel isolering af DNA fra 0,5 ml prøve
Laboratorieprotokol for manuel isolering af DNA fra 0,5 ml prøve Til isolering af genomisk DNA fra indsamlingssætserierne Oragene - og ORAcollect. Du kan finde flere sprog og protokoller på vores webside
Læs mereKonkurrence mellem to bakteriearter
1 Biologi-forsøg: Populationsbiologi/evolution Konkurrence mellem to bakteriearter Forsøget undersøger, hvordan en ydre miljøfaktor (temperatur) påvirker konkurrencen mellem to forskellige arter. I dette
Læs mereSådan bruger du Facebook
Sådan bruger du Facebook 1 Sådan kommer du på Facebook 2 Oprettelse af en Facebook-profil 3 Opsætte privatindstillinger, så kun venner kan følge med 4 Søge efter venner og bekendte 5 Skrive beskeder både
Læs mereDyrkning af svampe fra ost
Dyrkning af svampe fra ost Forord Velkommen til øvelsen Dyrkning af svampe fra ost der hører til undervisningsmaterialet Svampe laver din ost. Øvelsen er udarbejdet af Julie Mahler Nilsson med uundværlig
Læs mereManual til at redigere på stafetforlivet.dk for holddeltagere
Manual til at redigere på stafetforlivet.dk for holddeltagere Indhold Sådan tilmelder du dig et hold... 2 Sådan logger du ind på hjemmesiden... 4 Har du glemt dit kodeord?... 5 Sådan ser du oplysninger
Læs mereProtokol for genetisk bestemmelse af ABO blodtyper
Page1 Udarbejdet i samarbejde mellem: Kåre Lehmann, Annabeth Høgh Petersen, Anne Rusborg Nygaard og Jørn M. Clausen Page2 VIGTIGT: SKIFT PIPETTE SPIDSER/TIPS EFTER HVER GANG!! Så undgår du at forurene
Læs mereØvelse med tarmkræftceller i kultur.
Øvelse med tarmkræftceller i kultur. Baggrund Hver 3. dansker bliver ramt af kræft, inden de er blevet 75 år. Tyktarmskræft er den 3. hyppigste kræftform hos både mænd og kvinder, hvor henholdsvis 7.3
Læs mereDNA origami øvelse DNA origami øvelse
DNA origami øvelse Introduktion I denne øvelse bruger vi DNA origami teknikken til at samle en tavle af DNA med dimensioner på 70 nm x 100 nm. Tavlen dannes af et langt enkeltstrenget DNA molekyle, der
Læs mereBIOZYMER ØVELSE 3 BEKÆMP DIN β-lactamase - TEST DIN EGEN MEDICIN!
BIZYMER ØVELSE 3 BEKÆMP DIN β-lactamase - TEST DIN EGEN MEDICIN! FAGLIG BAGGRUND For at få det maksimale udbytte af denne øvelse er det en forudsætning, at teorien bag enzymer, enzymkinetik og resistensmekanismer
Læs mereElektroforese. Navne: Rami Kassim Kaddoura Roman Averin Safa Sarac Magnus Høegh Jensen Frederik Gaarde Lindskov
Elektroforese Navne: Rami Kassim Kaddoura Roman Averin Safa Sarac Magnus Høegh Jensen Frederik Gaarde Lindskov Klasse: 1.4 Fag: Biologi Vejleder: Brian Christensen Skole: Roskilde tekniske gymnasium, Htx
Læs mereSTUDERENDES ØVELSESARK TIL EKSPERIMENT A: NATURLIGE NANOMATERIALER
STUDERENDES ØVELSESARK TIL EKSPERIMENT A: NATURLIGE NANOMATERIALER Navn: Dato:.. MÅL: - Lær om eksistensen af naturlige nanomaterialer - Lysets interaktion med kolloider - Gelatine og mælk som eksempler
Læs mereVejledning: AMUUDBUD.DK
Vejledning: AMUUDBUD.DK Henvendt til uddannelsesinstitutioner Websiden amuudbud.dk bruges af uddannelsesinstitutioner til at ansøge om godkendelse til at udbyde AMU. Du skal have modtaget en e-mail med
Læs mereLærervejledning til Stop Madspild Produktion
Lærervejledning til Stop Madspild Produktion VELKOMMEN TIL I Stop Madspilds digitale forum gennemgår dine elever tre faser: Research, Findings og Produktion, før deres medieproduktioner er klar til at
Læs mereVEJLEDNING TIL BRUG AF LANDMAND.DK
VEJLEDNING TIL BRUG AF LANDMAND.DK 1 INDHOLDSFORTEGNELSE Tilføj eller fravælg kort...3 Foretrukne...4 Bestem min startside...6 Mine links...7 Favoritter...8 Notifikationer...9 Pop up...10 LANDMAND.DK ER
Læs mereVejledning til brug af i-bogen Biologi i udvikling
Vejledning til brug af i-bogen Biologi i udvikling I-bogen Biologi i udvikling er baseret på et system hvor lærerne har en lærerbog og eleverne hver deres personlige elevbog. En interessant konsekvens
Læs mereBiotechnology Explorer
Biotechnology Explorer Oprensning af genomisk DNA fra plantemateriale Manual Katalog nr. 166-5005EDU explorer.bio-rad.com Oversat og bearbejdet af Birgit Sandermann Justesen, Nærum Gymnasium, februar 2009
Læs mere[BESØGSSERVICE INSTITUT FOR MOLEKYLÆRBIOLOGI OG GENETIK, AU]
Enzymkinetik INTRODUKTION Enzymer er biologiske katalysatorer i alle levende organismer som er essentielle for liv. Selektivt og effektivt katalyserer enzymerne kemiske reaktioner som ellers ikke ville
Læs mereManual til at redigere på stafetforlivet.dk for holdkaptajner
Manual til at redigere på stafetforlivet.dk for holdkaptajner Indhold Sådan opretter du et hold... 2 Sådan logger du ind på hjemmesiden... 4 Har du glemt dit kodeord?... 5 Sådan redigerer og ser du oplysninger
Læs mereVejledning til indmeldelse af ordblinde for skoler og institutioner
Vejledning til indmeldelse af ordblinde for skoler og institutioner Indhold 1. Introduktion... 2 2. Hvem kan benytte indmeldelsesportalen?... 2 3. Sådan opretter du dig på indmeldelsesportalen... 2 1.
Læs mereAlgedråber og fotosyntese
Algedråber og fotosyntese Fotosyntesen er en utrolig kompleks proces, som kan være svær at forstå. Heldigvis kan fotosyntesen illustreres på en måde, så alle kan forstå, hvad der helt præcist foregår i
Læs mereKom godt i gang www.pengeuge.dk
Kom godt i gang www.pengeuge.dk Denne vejledning gennemgår: 1. Log på med sikkerhedskode (kun til oprettelse af kontaktpersoner) 2. Opret og login kontaktperson 3. Rediger profil og skift password 4. Vælg
Læs mereVelkommen til HK Extranet... 2 Adgang til HK Extranet... 2 Brugeroprettelse... 2 Log ind på siden... 3 Glemt kode... 3 Ændring af navn, ,
Velkommen til HK Extranet... 2 Adgang til HK Extranet... 2 Brugeroprettelse... 2 Log ind på siden... 3 Glemt kode... 3 Ændring af navn, e-mail, brugernavn eller kode... 3 Opret aktivitet... 4 Grundlæggende
Læs mere2. Gennemgå de offentligt tilgængelige sider. Hvad kan man finde hvor!
Forslag til Web kursus indhold. 1. Hvordan finder man vores side? 2. Gennemgå de offentligt tilgængelige sider. Hvad kan man finde hvor! 3. Gennemgå hvordan man bliver oprettet som medlem og får adgang
Læs merecpos Online Quickguide Version Sct. Norberts Skole https://sctnorberts.cposonline.dk/
cpos Online Quickguide Version 1.1.8 Sct. Norberts Skole https://sctnorberts.cposonline.dk/ SÅDAN OPRETTER DU EN BRUGER... 3 SÅDAN LOGGER DU IND... 5 SÅDAN INDBETALER DU PENGE PÅ ET KANTINEKORT... 6 SÅDAN
Læs mereVejledning til BUF Akademis administrationssystem for ledere
Vejledning til BUF Akademis administrationssystem for ledere Dette dokument indeholder vejledninger til brug af BUF Akademis administrationssystem, der understøtter håndtering af oprettelse og tilmeldinger
Læs merecpos Online Quickguide Version Sct. Ibs skole https://sctibs.cposonline.dk/
cpos Online Quickguide Version 1.0.9 Sct. Ibs skole https://sctibs.cposonline.dk/ SÅDAN OPRETTER DU EN BRUGER... 3 SÅDAN LOGGER DU IND... 5 SÅDAN TILKNYTTER DU EN RELATION TIL DIN KONTO (ADMINISTRER FLERE
Læs mereKAN PLASTIK NEDBRYDES?
KAN PLASTIK NEDBRYDES? Øvelsen består af flere dele Lav selv bioplast Design et nedbrydningsforsøg 1. Lav selv bioplast Teori Den plastik, der er i din smartphone, er forskellig fra plasten i din tandbørste
Læs mereViKoSys. Virksomheds Kontakt System
ViKoSys Virksomheds Kontakt System 1 Hvad er det? Virksomheds Kontakt System er udviklet som et hjælpeværkstøj til iværksættere og andre virksomheder som gerne vil have et værktøj hvor de kan finde og
Læs mereVejledning til skoletjenesten.dk for institutioner
Vejledning til skoletjenesten.dk for institutioner Indhold Login: Hvordan logger man ind på sin institutions side? (2 steps)... 2 Om -siden: Hvordan udfylder man sin pædagogiske profiltekst (7 steps)...
Læs mereFAGKOMPETENCER.DK Kom godt i gang som vejleder i systemet
FAGKOMPETENCER.DK Kom godt i gang som vejleder i systemet V 1.1 Juli 2017 DF Indhold Introduktion... 3 Sådan logger du på systemet som vejleder... 3 Oversigten... 5 Rediger en elevs oplysninger... 6 Opret
Læs mereFAGKOMPETENCER.DK Kom godt i gang som elev/bruger i systemet
FAGKOMPETENCER.DK Kom godt i gang som elev/bruger i systemet V 1.0 December 2016 DF Indhold Introduktion... 3 Oprettelse som elev... 3 Gennemgang af kompetenceoversigten... 8 Emne områder... 8 Registrering
Læs mereRedaktørvejledning for www.bredstrup-pjedsted.dk Skriv en artikel
Arbejdsgang - Skriv artiklens tekst - Gør billeder klar - Log-in på hjemmesiden - Opret ny artikel - Vælg kategori - Skriv overskrift - Indsæt tekst - Tilføj billeder - Gennemgå artiklens indstillinger
Læs mereProduktion af biodiesel fra rapsolie ved en enzymatisk reaktion
Produktion af biodiesel fra rapsolie ved en enzymatisk reaktion produceres fra rapsolie som består af 95% triglycerider (TG), samt diglycerider (DG), monoglycerider (MG) og frie fedtsyrer (FA). Under reaktionen
Læs mereVejledning til indmeldelse af ordblinde for skoler og institutioner
Vejledning til indmeldelse af ordblinde for skoler og institutioner Indhold 1. Introduktion... 2 2. Hvem kan benytte indmeldelsesportalen?... 2 3. Sådan opretter du dig på indmeldelsesportalen... 2 1.
Læs mereSTUDERENDES ØVELSESARK TIL EKSPERIMENT B: FLYDENDE KRYSTALLER
Navn: Dato:.. STUDERENDES ØVELSESARK TIL EKSPERIMENT B: FLYDENDE KRYSTALLER MÅL: - Forstå selv-samlingskonceptet. - Forstå måden et materiale opfører sig på, på makroskala, er afhængig af dets struktur
Læs merePlasmidoprensning med kogemetode Oprensning af plasmid DNA med kogemetode for brug til transformation og restriktionsanalyse
www.volvoxdk.dk C. Girnth-Diamba og B. Fahnøe, 2010 Claudia Girnth-Diamba og Bjørn Fahnøe Solrød Gymnasium, Solrød Center 2 DK 2680 Solrød Strand, Denmark E: sgcg@solgym.dk og sgbf@solgym.dk Plasmidoprensning
Læs mereVejledning til de bydende
Vejledning til de bydende Juni 2013/JET Indledning Indledning ibinder er et web-baseret program, til håndtering af byggeprojekter og ejendomsdrift på en hidtil uset brugervenlig og økonomisk måde. ibinder
Læs mereSådan laver du en animationsfilm
Sådan laver du en animationsfilm i Animtoon Først skal du åbne Animtoon. I start menuen trykker du på Film Værkstedetikonet, som er billedet af et ben der går, se figur 1. Figur 1: Film Værkstedetikonet.
Læs mereVELKOMMEN 3. KOM GODT I GANG 4 Log ind 5 Kontrolpanel 6 Tilpas profil 7 Tilknyt hold 8 Tilknyt fag 9
VEJLEDNING 1.0 Indhold VELKOMMEN 3 KOM GODT I GANG 4 Log ind 5 Kontrolpanel 6 Tilpas profil 7 Tilknyt hold 8 Tilknyt fag 9 SÅDAN OPRETTER DU EN QUIZ 10 Quiz info 11 Tilføj spørgsmål 12 Tilføj formel til
Læs mereManual til at redigere på stafetforlivet.dk for holdkaptajner
Manual til at redigere på stafetforlivet.dk for holdkaptajner Indhold Sådan opretter du et hold... 2 Sådan logger du ind på hjemmesiden... 4 Har du glemt dit kodeord?... 5 Sådan redigerer og ser du oplysninger
Læs mereFAGKOMPETENCER.DK Kom godt i gang som elev/bruger i systemet
FAGKOMPETENCER.DK Kom godt i gang som elev/bruger i systemet V 1.0 December 2016 DF Indhold Introduktion... 3 Oprettelse som elev... 3 Gennemgang af kompetenceoversigten... 8 Emne områder... 8 Registrering
Læs mereVejledning for forældre i brugen af mininstitution som digitalt kommunikationsværktøj
Vejledning for forældre i brugen af mininstitution som digitalt kommunikationsværktøj 1 Indhold: mininstitution vejledning til forældre... 3 Sådan logger du på systemet... 4 Sådan opsætter du din profil
Læs mereManual til Rsiden.dk for rygestoprådgivere
1 Manual til Rsiden.dk for rygestoprådgivere Muligheder på Rsiden.dk www.rsiden.dk er en side, som skal samle alle de relevante dokumenter, informationer og kurser til rygestoprådgivere på et sted. Der
Læs mereCOOP brugermanual til Podio BRUGERMANUAL. til Podio. 23. februar 2015 Side 1 af 38
BRUGERMANUAL til Podio 23. februar 2015 Side 1 af 38 INDHOLDSFORTEGNELSE HVAD ER PODIO?... 3 HVAD KAN VI PÅ PODIO?... 4 Aktivitet... 4 Bestyrelsesmøder... 4 Arrangementer & aktiviteter... 5 Opslagstavle...
Læs merePCR (Polymerase Chain Reaction): Opkopiering af DNA
PCR (Polymerase Chain Reaction): Opkopiering af DNA PCR til at opkopiere bestemte DNA-sekvenser i en prøve er nu en af genteknologiens absolut vigtigste værktøjer. Peter Rugbjerg, Biotech Academy PCR (Polymerase
Læs mereMunkekærskolen Tjørnholmvej 10 2680 Solrød Strand www.munkekaerskolen.dk eller www.munkekaer.dk E-mail: munkekaerskolen@solrod.dk Tlf.
Munkekærskolen Tjørnholmvej 10 2680 Solrød Strand www.munkekaerskolen.dk eller www.munkekaer.dk E-mail: munkekaerskolen@solrod.dk Tlf. 5618 2600 Forældreintra 1 September 2007 Vejledning for forældre ForældreIntra
Læs mereFSFIs lynguide til DFRs elektronisk bevissystem
FSFIs lynguide til DFRs elektronisk bevissystem Dette er en kort guide i anvendelsen af Dansk Førstehjælpsråd elektroniske bevissystem. Guiden viser og forklarer hvordan du som instruktør og medlem af
Læs mereManual til at redigere på stafetforlivet.dk for holddeltagere
Manual til at redigere på stafetforlivet.dk for holddeltagere Indhold Sådan tilmelder du dig et hold... 2 Sådan logger du ind på hjemmesiden... 4 Har du glemt dit kodeord?... 5 Sådan ser du oplysninger
Læs mereSÅDAN DELTAGER DU I DA VINCI-KONKURRENCEN UNGDOMSUDDANNELSERNE
SÅDAN DELTAGER DU I DA VINCI-KONKURRENCEN UNGDOMSUDDANNELSERNE Da Vinci-konkurrencen Da Vinci er for elever på HTX, STX, EUX eller EUD, som f.eks. har undervisning i teknologi, naturvidenskabelige fag
Læs mereVejledning til BUF Akademis administrationssystem for ledere
Vejledning til BUF Akademis administrationssystem for ledere Dette dokument indeholder vejledninger til brug af BUF Akademis administrationssystem, der understøtter håndtering af oprettelse og tilmeldinger
Læs mereVejledning til Aktivfuresoe.dk
Vejledning til Aktivfuresoe.dk Aktivfuresoe.dk er Furesøs nye portal, som er borgernes vindue ind til Furesøs aktive foreningsliv. Portalen er målrettet borgerne, mens det er foreningerne, som skal levere
Læs mereTlf. +45 7027 1699 Fax + 45 7027 1899
Firmaordninger I firmaoversigten kan du holde styr på dit kundekartotek samt disses bookinger. Der kan desuden oprettes andre firmaer end dit eget. Herved kan der udbydes særlige ydelser på med egne arbejdstider.
Læs mereBrugervejledning for DNA-mærkning
Brugervejledning for DNA-mærkning VIGTIGT - når du VIL sikre dig mod INDBRUD 1. Mærk dine ejendele. 2. Opsæt sikringsmærker så kan tyvene se, at du har sikret din bolig og dine værdier. 3. Registrer flaskens
Læs mereSTINA-vejledning STINA Online
DANMARKS NATIONALBANK Statistisk Afdeling Version 2.2 November 2008 STINA-vejledning STINA Online Indledning Vejledningen henvender sig til personer i virksomheder, der indberetter til Nationalbanken via
Læs mereManual til at redigere på stafetforlivet.dk for holddeltagere
Manual til at redigere på stafetforlivet.dk for holddeltagere Indhold Sådan tilmelder du dig et hold... 2 Sådan logger du ind på hjemmesiden... 8 Har du glemt dit kodeord?... 10 Sådan redigerer og ser
Læs mereDe fremstillede transformerede kloner kan eventuel analyseres som beskrevet i punkt C.
11. juni UVM sags nr. 166.471.021 AT jnr. 20050002257 Aftale mellem Undervisningsministeriet og Arbejdstilsynet om retningslinjer for godkendte forsøg med genteknologi i henhold til Bekendtgørelse om genteknologi
Læs mereBilag 1 Kort over udledninger
Bilag 1 Kort over udledninger 5 6 4 3 7 8 2 1 1 Sygehus + husspildevand 2 Husspildevand 3 Havn + husspildevand 4 Royal Greenland 5 Husspildevand 6 Husspildevand 7 Chokoladefabrikken 8 Dumpen Bilag 2 -
Læs mereTÅRNBY FORENINGSPORTAL
GUIDE TIL TÅRNBY FORENINGSPORTAL - for foreninger Tårnby Foreningsportal Tårnby Foreningsportal er foreningernes værktøj til booking af faciliteter, indsendelse af dokumentation samt kommunikation med
Læs mereSom substrat i forsøgene anvender vi para nitrophenylfosfat, der vha. enzymet omdannes til paranitrofenol
Enzymkinetik Introduktion I disse forsøg skal I arbejde med enzymet alkalisk fosfatase. Fosfataser er meget almindelige i levende organismer og er enzymer med relativt bred substrat specificitet. De katalyserer
Læs mereFronter for elever - Første undervisning
Fronter for elever - Første undervisning Fronter for elever - Første undervisning 1 Kom godt i gang 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9 1.10 1.11 0) Nulstille unilogin i UMS - (Elev) 4 1) Logge på Fronter
Læs mereGuide til upload af ruter og interessepunkter på Endomondo
Guide til upload af ruter og interessepunkter på Endomondo Denne guide indeholder følgende emner: A. Rettigheder B. Oprettelse af profil på Endomondo C. Oprettelse af selve ruten D. Redigering af oprettet
Læs mereHer er en lille vejledning, som viser dig, hvordan de gode historier kommer fra folks hoveder, gennem din mikrofon og ind på www.dr.dk/historier.
Til ambassadørerne Her er en lille vejledning, som viser dig, hvordan de gode historier kommer fra folks hoveder, gennem din mikrofon og ind på www.dr.dk/historier. Intro: Når folk dukker op ved dit arrangement,
Læs mere